培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)

　　培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動(dòng)物（或組織）生長(zhǎng)繁殖的，由不同營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類(lèi)物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。
　　1、培養(yǎng)基的過(guò)濾澄清
　　液體培養(yǎng)基必須澄清,瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無(wú)顯著沉淀,因此,須要采用過(guò)濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求.一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過(guò)濾法,濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂.
　　瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過(guò)濾.亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過(guò)濾.新制肉、肝、血和土豆等浸液時(shí)、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復(fù)過(guò)濾.如過(guò)濾法不能達(dá)到澄清要求、則須用蛋清澄清法.即將冷卻至55至60℃的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶?jī)?nèi),裝入量不得超過(guò)燒瓶容量的1/2,每1000毫升培養(yǎng)基加入1至2個(gè)雞蛋的蛋白,強(qiáng)力振搖3至5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121℃加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過(guò)濾即可.
　　2、培養(yǎng)基的分裝
　　培養(yǎng)基的分裝,應(yīng)按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi).分裝量不得超過(guò)容器裝盛量的2/3.容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者).分裝時(shí)好能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器.分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng).分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒,以利于培養(yǎng)基的*滅菌.每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20毫升培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌,以為測(cè)定該批培養(yǎng)基終pH之用.
　　3、培養(yǎng)基的滅菌
　　一般培養(yǎng)基可采用121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法.在各種培養(yǎng)基制備方法中,如無(wú)特殊規(guī)定,即可用此法滅菌.
　　某些畏熱成分,如糖類(lèi),應(yīng)另行配成20%或更高的濃液,以過(guò)濾或間歇滅菌法消毒,以后再用無(wú)菌操作技術(shù)、定量加于培養(yǎng)基.明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌.血液、體液和抗生素等則應(yīng)以無(wú)菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50℃左右的培養(yǎng)基中.
　　瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出,冷至55℃-60℃時(shí),擺置成適當(dāng)斜面,待其自然凝固.
　　4、培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試
　　每批培養(yǎng)基制備好以后,應(yīng)仔細(xì)檢查一遍,如發(fā)現(xiàn)破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等、均應(yīng)挑出棄去.并測(cè)定其終pH.
　　將全部培養(yǎng)基放入36±1℃恒溫箱培養(yǎng)過(guò)夜,如發(fā)現(xiàn)有菌生長(zhǎng),即棄去.
　　用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1至2管或瓶培養(yǎng)基,培養(yǎng)24至48小時(shí),如無(wú)菌生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不好.應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次,如結(jié)果仍同前,則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去,不能使用.
　　5、培養(yǎng)基的保存
　　培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處,好能放于普通冰箱內(nèi).放置時(shí)間不宜超過(guò)一周,傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過(guò)3天.每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁(yè)或明顯標(biāo)簽.